الکتروفورز آیزوزایمها و نقش آن در بررسی روابط بین شکارگر- شکار
مطالعهي برهمكنشهاي شكارگر- شكار با استفاده از الكتروفورز آيزوزايمها
اكولوژيستهايي كه در زمينهي شكارگري بندپايان كار ميكنند، در بررسيهاي خود از راهفنهاي (Techniques) مختلفي مانند مشاهدات مستقيم (در مزرعه و آزمايشگاه)، بررسي محتويات رودهي شكارگرها (در مورد شكارگراني كه با تغذيه از شكار خود، قطعات قابل شناسايي كوتيكول آنها را قورت ميدهند)، و راهفنهاي بيوشيميايي استفاده ميكنند. از راهفنهاي بيوشيميايي ميتوان به استفاده از تركيبات نشاندار مانند 32P ، كروماتوگرافي، راهفنهاي ملكولي DNA (مانند RAPD و RFLP)، راهفنهاي سرولوژيكي (مانند ELISA) و الكتروفورز آيزوزايمها اشاره كرد. راهفن الكتروفورز آيزوزايمها به دليل عدم دارا بودن مشكلات و محدوديتهاي ساير راهفنهاي بيوشيميايي، امروزه به عنوان يك روش راحت و مناسب، بيشتريت كاربرد را در بررسي برهمكنشهاي شكارگر- شكار دارد. مهمترين سيستم الكتروفورزي مورد استفاده، سيستم الكتروفورز ژل پلياكريلاميد داراي شيب غلظت (Concentration gradient polyacrylamide gel electrophoresis) ميباشد كه به خوبي باعث جداشدن آنزيمها شده و پس از رنگآميزي، باندهاي كاملا واضحي را به وجود ميآورد.
آنزيمهاي هدفي كه معمولا در اين راهفن مورد استفاده قرار ميگيرند، استرازها هستند. پس از انتخاب آنزيمهاي هدف، انتخاب باندهاي نشانگر (Marker bands) صورت ميگيرد. اين كار شامل تهيهي نمونه از افراد شكارگر گرسنه، افراد شكارگر تغذيه كرده از گونههاي خاص شكار و نيز از هر يك از گونههاي شكار ميباشد. با الكتروفورز كردن اين نمونهها در نهايت باند نشانگر مناسبي انتخاب ميشود. در صورت عدم تشكيل باندهاي نشانگر قابل قبول براي گونههاي هدف، ميتوان از ساير گروههاي آنزيمي استفاده كرد. پس از تهيهي باندهاي نشانگر، ميتوان نمونههاي جمعآوري شده از مزرعه را آناليز كرد. آماده سازي نمونهها سريع و ساده بوده و مشتمل بر هموژنيزه كردن رودهي جداشده يا در صورت غيرعملي بودن، كل بدن شكار در يك بافر است. براي تعيين گونههاي شكار، الگوي باند حاصل با نشانگرهاي موجود مقايسه ميشود.
آناليز الكتروفورزي آيزوزايمها در مطالعات شكارگري به خصوص در مورد گونههاي كوچك يا شكارگرهايي كه از چندين گونه شكار تغذيه ميكنند، نقش بسيار مهمي دارد چرا كه انجام اين گونه بررسيها با راهفنهاي سرولوژيكي به دليل احتمال مشكل بودن جمعآوري بيوماس كافي جهت تزريق به داخل بدن يك پستاندار براي تهيهي آنتيسرم، سخت و دشوار ميباشد.